计量单位
15N示踪材料的测量单位旨在用不同的符号表示15N相对于14n的相对丰度。有两个主要的测量单位;一种方法通常用于富含15N的材料,而另一种方法在使用15N丰度的自然变化来追踪N时更有用。
5.2.2 15n富集示踪剂
该单位表示同位素丰度为15N的百分比
总N
(1995年-):
也可以将15N丰度表示为相对于N2的变化天然丰度,称为原子% 15N过剩。大气中N2的15N/(15N + N)比值由Junk和Svec(1958)确定为0.003663,即每272个14N原子中有1个15N原子。
5.2.3 15n -自然丰度
该单位表示15N丰度相对于空气中N2表示的标准丰度的变化(Bedard-Haughn et al. 2003;Shearer和Kohl 1993)。由于15N丰度的自然变化较低,通常为大气N2的1-2% (Bedard-Haughn et al. 2003;Shearer和Kohl 1993),用来表示N自然丰度的单位是d15N(每mil 15N过剩,即每mil与标准的变化):
d15N = R(样品)-R(标准)x 1;000;
R(标准)R也可以定义为:
R = 15N + 14N或R = 14N。
第一个定义在源识别研究中更有用,而第二个定义则用于同位素鉴别。后者是最常用的(Bedard-Haughn et al. 2003;Mariotti et al. 1982)。在自然丰度的水平上,两种定义实际上是相同的,因为使用两种定义的d15N的差异远远小于测量误差(Barraclough 1995;Hauck et al. 1994;Shearer和Kohl 1993)。
5.3示踪材料
为了研究不同自然或农业生态系统中的N源或汇强度、流速或命运,可以使用两种替代方法:15N丰度的自然差异或人工改变15N含量的N源,以产生示踪剂与周围环境之间的显著差异(bedar - haughn et al. 2003;Knowles和Blackburn 1993)。
在许多研究中使用了15N丰度的自然变化(Kerley和Jarvis 1997),尽管它受到以下事实的限制,即需要识别具有相当不同同位素组成的定义良好的自然n池(Gerzabek et al. 2001)。beard - haughn et al.(2003)指出,平均而言,不同来源之间的最小差异约为5.9%。土壤中的同位素鉴别(第5.4.1节)N周期通过使用自然丰度方法,使氮周转和动态的量化复杂化(Wagner 1991)。
含有非自然高浓度或低浓度15N的材料通常用于以下情况:自然差异太低,无法用于追踪N;自然可变性高到足以覆盖源和汇之间的任何差异;或者需要长时间监测过程。在后一种情况下,尽管由于氮流而逐步重新平衡,但需要长期保持高梯度。虽然富集材料能够监测许多过程,否则无法量化或检测,但自然丰度方法(NAMs)能够在没有任何干扰的情况下监测系统。然而,在氮肥普遍施用的农业生态系统中,氮循环干扰通常不是问题(Bedard-Haughn et al. 2003)。
当使用人工示踪剂时,可以使用富含15n或减少15n的示踪剂。耗尽的能源更便宜,也不会污染实验室设备。不幸的是,它们的示踪值相当于只含有0.7原子% 15N的材料,因此,氮只能在施用年份追踪到植物中,只有在有机氮含量低于1.5 g N kg的土壤中才能追踪到土壤硝酸盐和有机池中(Hauck et al. 1994)。
两种主要的15n标记技术通常用于研究土壤中氮的转化植物系统(1) 15N示踪技术和(2)15N同位素稀释技术。第一种技术基于底物池的15N标记,随后监测同位素在系统中随时间的移动。后一种技术用15N标记土壤氮池,并监测池中N含量变化的速率,池中15N原子%的富集量被14N流入稀释(Hart和Myrold 1996年)。
在开始一项新的实验之前,有必要确定用于追踪N的源和汇之间所需的原子%的差异,从而确定标记材料中的15N丰度。这可以通过估计所监测过程中示踪剂稀释的可能程度来实现。例如,对于许多农田作物,植物中来源于氮的肥料被来自土壤的未标记氮稀释了两到四倍(Powlson和Barraclough 1993)。计算方法的例子可以在Hauck et al.(1994)和Powlson and Barraclough(1993)中找到。
5.3.1样品采集与处理
在进行有标记氮素的实地研究时,收集代表性土壤和植物样本的需求比无标记氮素更大,因为少量污染会对结果产生严重的混杂影响(Hauck et al. 1994;Powlson和Barraclough 1993;Shearer和Kohl 1993)。
随着氮同位素在农业研究中的应用,通常对植物材料和土壤进行取样。植物取样通常需要收集作物的总生物量,然后将其划分为组成植物的部分。建议将植物分成N含量相对均匀的组分,因为不同组分的15N丰度不同(见第5.3.5.1节的同位素鉴别)。如果植物部分没有完全混合,那么在样品材料的原子% 15N的测定中可能会有误差。整株植物的原子% 15N可以计算为其各部分的原子% 15N对各部分N量(kg N ha-1)的加权平均值。如果不可能将植物分成均匀的组织,那么只有在干燥和彻底研磨到颗粒尺寸低于100目后才对不均匀的混合物进行取样是很重要的(Hauck et al. 1994;Powlson和Barraclough 1993;Shearer和Kohl 1993)。
在多季研究中,应特别注意确保取样或收获操作不会造成地块之间的交叉污染。当大量物质(例如玉米秸秆)在农田中运输时,其15N浓度相对较高(Hauck et al. 1994;Powlson和Barraclough 1993)。
对于土壤取样,需要混合足够数量的岩心,以便以给定的精度准确估计小区平均值。戈麦斯和戈麦斯(1984)和Hauck等人(1994)提供了核心估计数量的例子。在探索不同的土壤层位时,通常会发现不同的15N富集。靠近地表的土壤通常比深层土壤具有更高的15N富集(Powlson和Barraclough 1993)。
取样和材料处理也需要非常小心地执行,并使用合适的设备,以避免交叉污染。在准备样品进行分析时要遵循的最重要的规则是(a)避免在所有步骤中进行定量转换同位素分馏在不完全转换或N损失时;(b)避免任何污染,特别是用浓缩物质污染自然丰度样品;(c)具有代表性的均质子样品;(d)复制样本;(e)实验室间比较。当需要研磨植物或土壤样品时,圆盘或球磨机在后续样品之间更容易清洗,通常比锤磨或刀磨能实现更细的研磨(Powlson和Barraclough 1993)。
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